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菌落計數(shù)器是怎樣操作的?
點擊次數(shù):2799 更新時間:2017-04-20
菌落計數(shù)器在皮氏培養(yǎng)皿上計算微生物的數(shù)目是一件非常耗時的工作。有了菌落計數(shù)器這種儀器,用戶就不必為這項復(fù)雜的操作費心了,它可廣泛應(yīng)用在每個生物實驗室中。
菌落計數(shù)器基本操作一般包括:樣品的稀釋--傾注平皿--培養(yǎng)48小時--計數(shù)報告
1.操作方法:培養(yǎng)到時間后,計數(shù)每個平板上的菌落數(shù)。可用肉眼觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏。在記下各平板的菌落總數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù),計算處原始樣品中每克(或每ml)中的菌落數(shù),進行報告。
2.到達規(guī)定培養(yǎng)時間,應(yīng)立即計數(shù)。如果不能立即計數(shù),應(yīng)將平板放置于0-4℃,但不得超過24h。
3.計數(shù)時應(yīng)選取菌落數(shù)在30~300之間的平板(SN標(biāo)準(zhǔn)要求為25~250個菌落),若有二個稀釋度均在30~300之間時,按國家標(biāo)準(zhǔn)方法要求應(yīng)以二者比值決定,比值小于或等于2取平均數(shù),比值大于2則其較小數(shù)字(有的規(guī)定不考慮其比值大小,均以平均數(shù)報告)。
4.若所有稀釋度均不在計數(shù)區(qū)間。如均大于300,則取zui高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。如均小于30,則以zui低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報告之。如菌落數(shù)有的大于300,有的又小于30,但均不在30~300之間,則應(yīng)以zui接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。如所有稀釋度均無菌落生長,則應(yīng)按小于1乘以zui低稀釋倍數(shù)報告之。有的規(guī)定對上述幾種情況計算出的菌落數(shù)按估算值報告。
5.不同稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)與稀釋倍數(shù)成反比(同一稀釋度的二個平板的菌落數(shù)應(yīng)基本接近),即稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少,稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,則應(yīng)視為檢驗中的差錯(有的食品有時可能出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,如酸性飲料等),不應(yīng)作為檢樣計數(shù)報告的依據(jù)。
6.當(dāng)平板上有鏈狀菌落生長時,如呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限,則應(yīng)作為一個菌落計,如存在有幾條不同來源的鏈,則每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算,不要把鏈上生長的每一個菌落分開計數(shù)。如有片狀菌落生長,該平板一般不宜采用,如片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻,則可以半個平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。
7.當(dāng)計數(shù)平板內(nèi)的菌落數(shù)過多(即所有稀釋度均大于300時),但分布很均勻,可取平板的一半或1/4計數(shù)。再乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)作為該平板的菌落數(shù)。
8.菌落數(shù)的報告,按國家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定菌落數(shù)在1~100時,按實有數(shù)字報告,如大于100時,則報告前面兩位有效數(shù)字,第三位數(shù)按四舍五入計算。固體檢樣以克(g)為單位報告,液體檢樣以毫升(ml)為單位報告,表面涂擦則以平方厘米(cm2)報告。
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